1 材料

动物SPF级、雄性 SD 兽体，6～7周龄，体重 200～250g，购自浙江维通利华实验动物技术有限公司。动物生产许可证号：SCXK（浙）2019-0001。药品与试剂 药物乳状注射液，规格：每支100mg/10ml，批号：，批准文号：国药准字H，西安立邦制药有限公司生产；脂肪乳注射液（C14～24），规格：500ml：50g（大豆油）：6g（卵磷脂），批号：80MM028。

2 方法

2.1 实验动物分组及处理

选择45只SD兽体，将其随机分为对照组与低、高剂量实验组，各15只。对照组兽体腹腔注射脂肪乳注射液（C14～24）；低、高剂量实验组分别腹腔注射100，300mg·kg-1药物注射液（10mg·ml-1）。整个实验过程中密切观察兽体呼吸情况并记录。

2.2 以TUNEL法检测兽体海马神经元凋亡情况

海马组织采集与石蜡切片制作同2.3，取海马组织石蜡切片，按照TUNEL细胞凋亡检测试剂盒说明书进行操作。每个标本随机选择3个视野，细胞核染为棕黄色为凋亡细胞，于光学显微镜下观察并计数凋亡阳性细胞数。细胞凋亡指数=阳性细胞数/总细胞数×100%。

2.3 以高效液相色谱法测定海马组织Glu和GABA含量

海马组织采集同2.3，参照文献进行，检测样品中Glu和GABA浓度。Glu和GABA含量（μg·g-1）=[样品浓度（μg·ml-1）×样品溶解体积（ml）]/样品重量（g）。

3 统计学处理

用SPSS21.0软件进行统计分析。计量资料用x珋±s表示，多组间比较用单因素方差分析，符合正态分布而且方差齐时，2组间数据采用Dunnett＇st检验；不符合正态分布时，用秩和检验分析。计数资料用率（%）表示，用χ2检验比较。

4 结果

4.1 逃逸潜伏期比较

整个实验过程中密切观察兽体呼吸情况，其中低、高剂量实验组分别有1，3只兽体死亡，对照组无兽体死亡。定位航行实验第1～4天，3组兽体的逃逸潜伏期均逐渐缩短。与对照组比较，低、高剂量实验组兽体在1～4d的逃逸潜伏期均明显延长，且高剂量实验组长于低剂量实验组（均P＜0.05）。

4.2 空间探索实验比较

对照组与低、高剂量实验组兽体穿越原平台的次数分别为（5.），（3.），（1.）次；空间探索时间分别为（32.），（23.），（19.）s。与对照组比较，低、高剂量实验组兽体穿越原平台的次数减少，且高剂量实验组少于低剂量实验组；空间探索时间缩短，且高剂量实验组短于低剂量实验组（均P＜0.05）。

4.3 各组兽体海马组织病理学变化

对照组兽体海马神经元形态正常，排列紧密、整齐；低、高剂量实验组兽体海马神经元形态不规则，排列紊乱、疏松，胞间距较大，且胞核固缩或碎裂，深染。上述海马神经元的异常现象以高剂量实验组最明显。

4.4 各组兽体海马神经元凋亡情况

对照组与低、高剂量实验组兽体海马神经元的凋亡指数分别为（18.）%，（37.）%，（51.）%。与对照组比较，低、高剂量实验组兽体海马神经元的凋亡指数明显升高，且高剂量实验组高于低剂量实验组（均P＜0.05）。

5 讨论

通过化学麻醉技术对兽体兽体进行有效的残留麻醉，再与相关技术质量标注和管理规范要求相对比，保证其处理结果和应用模型符合预期。本文通过对兽体兽体残留麻醉中化学麻醉技术起到的作用和实际的应用方式进行客观分析，对于今后麻醉技术的发展具有一定的参考作用。药物因具有起效快、诱导平稳、苏醒快且恢复完善等优点而作为临床常用的镇静、麻醉药物，但其使用后可增加认知功能障碍的发生风险。本研究结果显示，与对照组比较，低、高剂量实验组兽体在1～4d的逃逸潜伏期均明显延长；穿越原平台的次数减少，空间探索时间缩短，同时海马神经元的凋亡指数升高，且以上指标以高剂量实验组的变化最明显，表明药物可导致兽体空间学习、记忆能力降低，促进海马神经元凋亡，从而损伤神经功能，导致认知功能障碍。产生抑制性突触后电位，抑制长时程增强，故对学习记忆的形成具有抑制作用。本研究结果显示，低、高剂量实验组兽体海马组织Glu含量与Glu/GABA明显降低，GABA含量升高，提示药物可降低海马组织Glu含量，而升高GABA含量，使Glu/GABA下降，从而损伤学习、记忆能力，导致认知功能障碍。随着科学技术的不断发展，相应的麻醉技术也越来越精准和有效，现代化的技术模型已经逐渐得到完善，进入了现实的应用阶段。通过对色谱质谱联用技术以及超临界流体色谱技术的良好运用，可以将各种麻醉手段实现全面的升级和优化，对麻醉的灵敏度以及整体的技术提升。

文章来源：《中国预防兽医学报》 网址: http://www.zgyfsyxbzz.cn/qikandaodu/2021/0205/532.html

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